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  • 小鼠睾丸基因PDZD9的克隆及亚细胞定位分析

    作者:周军媚;姚峰;刘鑫;王宗保;吴端生;陈春芳;贺震;余坚

    目的 克隆小鼠睾丸基因PDZD9并构建pEGFP-C1-PDZD9重组栽体进行亚细胞定位分析. 方法 提取小鼠睾丸RNA,利用逆转录—聚合酶链反应(RT-PCR)技术从小鼠睾丸cDNA中分离PDZD9基因.将PDZD9基因定向克隆至带有绿色荧光报告基因的真核表达载体pEGFP-C1.利用阳离子聚合物方法转染COS7细胞,荧光显微镜下观察其亚细胞定位. 结果 小鼠睾丸基因PDZD9克隆成功,成功构建真核表达载体pEGFP-C1-PDZD9,亚细胞分析表明该蛋白定位于细胞核和细胞质中,主要分布在细胞核中. 结论 成功克隆了小鼠睾丸基因PDZD9,并初步分析了其在细胞中的定位情况,为下一步对PDZD9的功能研究奠定了基础.

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