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微RNAs/血液/分离和提纯文献资料
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常规TRIzol法提取血清microRNA的条件改进
目的 对常规TRIzol法提取血清中microRNA(miRNA)的方法进行改进,以提高血清miRNA的提取效率.方法 运用常规TRIzol法和改进方法,分别提取健康人血清中的miRNA.改进条件为分离血清后再分别进行超声、10％ SDS(十二烷基硫酸钠)或者10％ SDS联合超声进行预处理.以实时荧光定量PCR检测血清中miRNA-218和miRNA-346的含量,通过比较miRNA-218和miRNA-346的相对表达量来鉴定不同方法对miRNA检测值的影响,从而反映miRNA的检出效率.结果 超声组与常规法组的检出效率比较差异无统计学意义(P＞0.05);SDS组与SDS联合超声组检出效率均优于常规组(P＜0.05),此两组改进方法可使荧光定量PCR检测中miRNA-218和miR-NA-346的相对表达量明显提高.而SDS联合超声组检出效率比单纯SDS组更好(P＜0.05).结论 10％SDS联合超声预处理后,可有效提高目的血清miRNA的检出效率.
关键词： 微RNAs/血液/分离和提纯 聚合酶链反应
