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  • 多重PCR法检测外周血单个核细胞中的HBVDNA与HBVcccDNA

    作者:郭皓宇;谭德明;刘洪波

    目的建立多重聚合酶链反应法(Multiplex Polymerase chain reaction,M-PCR),揭示慢性乙肝患者外周血单个核细胞(PBMC)中HBVDNA的存在状况.方法采用一种把一套扩增乙肝病毒基因组DNA(HBV genome DNA)的引物和一套特异性扩增乙肝病毒共价闭合环状DNA(HBV ccc DNA)的引物掺入到一个体系中的 PCR法,检测PBMC中的HBVDNA核酸分子.结果 PCR法可使处于同一PBMC中的总HBVDNA和HBVcccDNA同时分别良好的扩增出来;30例慢性乙肝患者的PBMC中,总HBVDNA与HBVcccDNA同时检出者23例,检出率76.6 %;检出HBVcccDNA者占检出总HBVDNA者的82.1%.结论 PBMC中的HBVDNA部分参与复制.成功的建立了能同时检测HBV基因组DNA与HBV cccDNA的M-PCR方法.

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