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  • 恶性疟原虫海南株线粒体复合体Ⅱ辅基铁-硫蛋白基因克隆及序列分析

    作者:马长玲;余新炳;单志新;吴忠道;徐劲

    目的构建恶性疟原虫海南株线粒体复合体Ⅱ琥珀酸-泛醌还原酶辅基铁-硫蛋白(iron-sulfur protein,Ip)基因原核表达质粒pET28α-Ip,测定Ip基因序列,为研究铁-硫蛋白基因功能奠定基础.方法采用PCR技术从恶性疟原虫海南株基因组DNA中扩增出Ip基因,扩增产物经纯化后,用BamHI+XhoI双酶切,定向克隆人pET28α质粒,转化大肠杆菌DH5α,再用BamHI+XhoI酶切及PCR扩增对重组子进行鉴定.用Sanger双脱氧链终止法进行DNA序列测定,并进行同源性比较.结果筛选出编码海南株Ip基因的原核表达质粒pET28α-Ip,海南株Ip基因序列与K1、3D7株高度同源.结论pET28α-Ip重组质粒的构建,为进一步研究铁-硫蛋白基因奠定基础.

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