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红细胞膜蛋白颗粒冷冻蚀刻图像反差不良的原因分析
目的:探讨了红细胞膜蛋白颗粒冷冻蚀刻图像反差不良的相关因素,解决在应用电镜冷冻蚀刻技术制备红细胞膜蛋白颗粒样品的过程中,部分颗粒图像模糊、反差不良,颗粒粘连严重,导致辨识与计数困难的问题.方法:本实验通过采集DMD基因携带者外周静脉血样品,经过抗凝、离心、固定和防冰晶等处理步骤后,应用HUS-5型真空喷镀仪及配套装置,在-100℃条件下制备复型膜.在以往工作的基础上,分析蛋白颗粒图像成因,采取在喷镀过程中控制喷镀电流与真空度,以及在喷镀前精选喷镀源,并在仪器准备阶段注重真空系统良好的清洁和维护等多种手段,制备出了质量良好的冷冻蚀刻复型膜.结果:制备出的复型膜在电镜下显示的蛋白颗粒图像清晰可辨,反差良好.部分改善了图像质量,收到良好的效果.结论:采用精心烧制并优选喷镀源,在冷冻蚀刻实验过程中注重喷镀电流与真空度的配合,结合改进实验器材的准备工作等方法,可提高膜蛋白颗粒冷冻蚀刻图像的质量,制备出边界清晰,背景杂质较少,易于识别的蛋白颗粒复型膜.
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同态滤波技术在膜蛋白颗粒图像增强中的应用
目的:为了应用计算机对透射电镜膜蛋白颗粒图像进行颗粒的自动识别与计数处理工作,探索一种改善颗粒图像反差不均匀的校正算法.方法:尝试将同态滤波技术应用于电子束入射-透射模型的膜蛋白颗粒图像处理中.针对颗粒图像明暗反差不均、颗粒形态边界模糊不清、难以辨认的特点,通过实验改造和调整高斯、巴特沃斯、指数高通同态滤波器的参数,并在此基础上重新构造了巴特沃斯带阻同态滤波和指数-巴特沃斯带阻同态滤波方法.通过压缩图像中反映背景的低频信号,展宽表现颗粒细节的高频分量,实现改善图像反差不均的目的.结果:实验所构造的同态滤波器处理颗粒图像的效果各有不同,但均能突出颗粒的细节,减轻背景干扰的影响,实现对图像的非线性校正.结论:经过综合比较5种同态滤波函数对颗粒图像的处理效果,认为指数-巴特沃斯带阻同态滤波方法获得的改善反差不均的效果相对更理想,能更好地满足颗粒的识别与分割的要求.
