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14-3-3σ对p73基因转录活性的影响
背景与目的:p53基因是14-3-3σ的主要调节基因,活化的p53可以诱导14-3-3σ的表达,反过来14-3-3σ又可以稳定p53的表达并且增加其转录活性.p53基因家族中的其它成员p63和p73也存存着一些与p53基因相似的功能.本研究目的在于探讨14-3-3σ对p73基因转录活性的影响.方法:采用荧光素酶报告剂分析、反转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)及Western blot研究在p53缺失型人类肺癌细胞系H1299中14-3-3σ对p73基因转录活性的调节作用;用集落形成实验研究在p53突变型人类乳腺癌细胞系MDA-MB-436中14-3-3σ对p73基因转录活性的调节作用.结果:荧光素酶报告剂分析结果显示,在H1299细胞系中,转染p73可以使bax和p21WAF1启动子介导的荧光素酶表达增加;共转染p73和14-3-3σ后,bax和p21WAFI启动子介导的荧光素酶表达均比单独转染p73时的表达高,并且荧光素酶的表达和14-3-3σ的转染剂量之间存在着浓度依赖性(P＜0.01).RT-PCR和Western blot结果也显示,转染p73可以使bax和p21WAF1的表达增加;共转染p73和14-3-3σ后,bax和p21WAF1的表达均比单独转染p73时的表达高(P＜0.01).集落形成实验结果显示,在MDA-MB-436细胞系中,转染p73可以使细胞的克隆数减少;共转染p73和14-3-3σ后,细胞克隆数比单独转染p73时少(P＜0.01).结论:14-3-3σ可以增加p73基因的转录活性,并且14-3-3σ对p73基因转录活性的调节存在剂量依赖性.
