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上皮细胞转化文献资料
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EB病毒潜伏膜蛋白1对人支气管上皮细胞转化作用机理的研究
背景与目的:目前许多研究显示潜伏膜蛋白 1(latent membrane protein1,LMP1)在一些上皮源性肿瘤的发生中可能起重要作用,但有关 LMP1对正常上皮细胞作用的研究并不是很多.因而,本研究拟观察 EBV LMP1对人支气管上皮细胞( human bronchial epithelial,HBE)的转化作用,并初步探讨其作用机制.方法:将 LMP1单独或与 hTERT逆病毒表达载体共同转染 HBE细胞,经抗性药物筛选获得阳性细胞克隆;通过绘制细胞生长曲线,进行软琼脂集落形成试验、端粒酶活性检测和 cyclin A、 p21、 CDK4蛋白表达的检测,研究 LMP1对 HBE细胞生物学特性的影响.结果:共同转染 LMP1和 hTERT的 HBE细胞生长旺盛.各组细胞 HBE/LMP1+ hTERT、 HBE/LMP1和 HBE/pLNSX+ pBabe的软琼脂集落形成率分别为 22.98%、 16.94%和 8.85%;端粒酶活性分别为 2.825、 2.441、 1.876.我们进行 Western blot检测发现前两组细胞 cyclin A表达上调、 p21表达下调,且两组之间无明显差异;而 CDK4蛋白在各组之间表达一致.结论:在转化 HBE细胞的过程中, LMP1和 hTERT可能具有协同作用,通过调节 cyclin A和 p21蛋白的表达水平,引起细胞异常增殖,使细胞向恶性化转变.
