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食管鳞状上皮癌中表达失调蛋白的研究
背景与目的:食管鳞状上皮癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)是一种具有高发性和高死亡率疾病,本研究应用蛋白质组学方法分析 ESCC中异常表达的蛋白.方法:对 ESCC/癌旁组织标本的冰冻切片进行显微切割,分别分离肿瘤细胞和癌旁上皮细胞,提取细胞总蛋白,通过双相电泳得到 ESCC及癌旁上皮的蛋白表达谱,采用质谱技术鉴定肿瘤表达异常的蛋白.结果:比较 7对食管癌 /癌旁组织的蛋白表达谱,并对差异的蛋白进行质谱分析发现:11个蛋白在食管癌中表达明显异常,其中热休克蛋白 27(HSP27)在 3例 ESCC中表达上调,钙依赖磷脂结合蛋白 ANNEXIN I在正常食管粘膜存在分子量基本相同、等电点彼此相差约为 1的 3种变体(isoforms),3种 ANNEXIN I变体均在 5例食管癌中表达下调.结论:双相电泳连接质谱的蛋白质组学方法是快速筛选肿瘤异常表达蛋白的有效手段,HSP27和 ANNEXIN I的表达失调是食管癌发生过程中的频发事件.
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AnnexinI在α粒子转化细胞及肺癌组织中高表达
目的:探讨AnnexinI表达与肺癌及细胞转化的关系.方法:Western印迹、Northern印迹检测永生化人支气管上皮BEP2D细胞及α粒子照射转化后BEP2D细胞中AnnexinI在mRNA和蛋白质水平的表达,细胞免疫化学检测AnnexinI在BEP2D细胞中的分布.Western印迹检测肺癌病人正常组织与肿瘤组织中AnnexinI蛋白质的表达.结果:AnnexinI在α粒子照射转化后BEP2D细胞中mRNA和蛋白质水平上的表达光密度均为永生化人支气管上皮BEP2D细胞的1.5倍;AnnexinI在BEP2D细胞中分布于胞浆及细胞膜.本研究收集了8例肺鳞癌、4例肺腺癌病人的肺肿瘤组织及正常组织,AnnexinI在肺癌组织中的表达明显高于正常组织(P<0.01),AnnexinI在肿瘤组织中表达的光密度与正常肺组织之比为2.7.结论:AnnexinI在肺癌组织过表达,表明AnnexinI可能与肺癌及细胞恶性转化的发生发展有关.永生化及α粒子照射恶转BEP2D细胞为进一步研究AnnexinI在恶性转化中的作用提供了良好的模型.
