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腺病毒介导的反义 VEGF与可溶性 VEGF受体联合对实验性 MM45T.Li小鼠肿瘤生长及转移的影响
目的：构建并观察含反义 VEGF、 sflt-1、 sflt-1联合反义 VEGF及 lacZ的重组腺病毒对 MM45T.Li小鼠肿瘤生长及转移的影响。方法：通过 RT-PCR从胚胎小鼠中克隆可溶性 VEGF受体基因 (sflt-1)，并比较 sflt-1与 3′末端缺失可溶性 VEGF受体基因 (3′Δ flt-1) 在 COS-7细胞中的表达效率；将含反义 VEGF的重组腺病毒和含 lacZ报告基因的重组腺病毒分别感染 MM45T.Li细胞株，观察反义 VEGF体外抑制 VEGF分泌的作用；采用 CAM实验模型，观察含目的基因的重组腺病毒对鸡胚血管形成的影响；分别将含不同目的基因的重组腺病毒进行瘤内直接注射，每周体外测量肿块大小， 7周后处死小鼠，观察有无转移，并对肿瘤组织冰冻切片后进行 VEGF、可溶性 VEGF受体（ sflt-1）表达及新生血管形成的免疫组织化学分析；余下的小鼠共观察 13周，记录小鼠死亡时间，计算生存函数。结果：含反义 VEGF的重组腺病毒感染 MM45T.Li细胞后，能明显减少 VEGF的分泌 (P<0.01)；鸡胚注射 Ad sflt 1、 Ad antisense VEGF及 Ad sflt 1/antisense VEGF后，其血管的分布较注射 Ad lacZ组明显减少，甚至造成死胚；经 sflt 1、反义 VEGF治疗的荷瘤小鼠肿瘤生长速度较对照组明显减慢（ P< 0.01），肿瘤体积明显变小（ P< 0.01），肿瘤转移率减少（ P< 0.05）， 13周生存率明显延长（ P< 0.01）；而且反义 VEGF与 sflt 1联合具有正叠加效应。结论：腺病毒介导的反义 VEGF与 sflt-1都能有效地抑制新生血管的形成，反义 VEGF与 sflt-1联合可明显增强抑制效果；反义 VEGF与 sflt 1在抑制新生血管形成的同时也抑制了肿瘤的生长与转移，从而延长了荷瘤小鼠的生存期。
