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新伤续断汤对成骨细胞增殖及骨形态发生蛋白的影响
【目的】探讨新伤续断汤(由骨碎补、续断、地鳖虫等组成)对大鼠成骨细胞增殖以及骨形态发生蛋白2(BMP-2)表达的影响。【方法】采用血清药理学方法制备新伤续断汤含药血清,与α-MEM培养基配成细胞培养液。按酶序列消化法从SD大鼠乳鼠颅骨获取、培养成骨细胞,以碱性磷酸酯酶染色和钙结节染色鉴定细胞。取第3~4代细胞用细胞增殖—毒性(CCK-8)法检测经体积分数为5%、10%、20%新伤续断汤含药血清处理24、48、72 h后的细胞增殖情况。用含体积分数10%的新伤续断汤、续断、骨碎补、空白对照含药血清分别培养细胞,采用微量酶标法检测碱性磷酸酶的活性,酶联免疫吸附法检测BMP-2的表达。【结果】新伤续断汤对成骨细胞的影响呈时间、浓度上的依赖性,其中浓度为10%时效果明显。体积分数10%的新伤续断汤、骨碎补、续断含药血清的成骨细胞碱性磷酸酶活性较空白对照组显著升高,差异有统计学意义(P<0.01);7 d时,新伤续断汤组、骨碎补组与空白对照组比较, BMP-2表达显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。【结论】新伤续断汤能促进大鼠成骨细胞碱性磷酸酶活性及BMP-2的表达,其中单味药骨碎补可能发挥重要作用,其促进骨折愈合机制可能与提高细胞的成骨功能有关。