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间充质干细胞及其培养上清与融冻产物对脐血CD34~+细胞扩增及分化的作用
[目的]探讨人骨髓间充质干细胞(MSC)及其培养上清、融冻产物对脐血CD34~+细胞扩增及分化的作用.[方法] 分离纯化人骨髓MSC,收集纯化三代的MSC培养上清,采用反复冻融法获得MSC融冻产物,采用免疫磁珠分选系统纯化脐血CD34~+细胞.实验分为4组.分别为含MSC滋养层组、MSC上清组、MSC融冻产物组及单纯造血生长因子(HGFs)对照组.流式细胞仪检测人脐血CD34~+细胞在这四种培养体系中第6天和第12天有核细胞数及CD34~+、CD34~+CD38~-、CD41~+、CD19~+,CD3~+细胞含量.[结果] ① MSC滋养层组对脐血有核细胞和对脐血CD34~+,CD34~+CD38~-的扩增能力强,MSC培养上清组和MSC滋养层相比具有类似的作用,但其作用强度减弱(P<0.05).②MSC培养上清和MSC均具有抑制脐血CD34~+细胞分化为CD3~+和CD19~+细胞的作用,差异无显著性(P>0.05).③ MSC培养上清和MSC均具有促进脐血CD34~+细胞向CD41~+细胞分化的作用,MSC滋养层的作用强于MSC培养上清(P<0.05).④ MSC融冻产物已完全丧失对脐血CD34~+细胞扩增和分化作用,与单纯因子对照组相似(P>0.05).[结论] MSC培养上清对脐血CD34~+、CD34~+CD38~-细胞均具有扩增作用,而且可促进脐血CD34~+细胞向CD41~+细胞分化.
关键词: 间充质干细胞 脐血CD34~+细胞 MSC培养上清 MSC融冻产物