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CARTPT对过氧化氢诱导人脐静脉内皮细胞衰老的影响
目的 探讨CARTPT对过氧化氢(H2 O2)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)衰老的影响.方法 采用shRNA方法构建干扰CARTPT基因表达质粒,采用qPCR方法检测CARTPT敲低效率.HUVECs分为3组:(1)对照组(纯培养基培养);(2)模型组(培养基+100μmol/L H2O2);(3)CARTPT敲低组(培养基+shRNA CARTPT).培养3 d后,衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-beta-Gal)染色及Western blot检测p53和p21来反映细胞衰老程度;Western blot检测AMPK/mTOR信号通路中AMPK和磷酸化AMPK(pAMPK),S6和磷酸化S6(pS6)的表达水平.Ki67检测细胞增殖能力.CCK8检测细胞活力.结果 与对照组相比,模型组SA-beta-Gal阳性率及p53和p21表达水平增加(P<0.05).与模型组相比,CARTPT敲低组SA-beta-Gal阳性率及p53和p21表达水平降低(P<0.05),且pAMPK和pS6表达水平随之变化.细胞增殖实验显示转染shRNA CARTPT质粒的HUVECs增殖能力增强.结论 CARTPT通过调节AMPK/mTOR信号通路影响内皮细胞的衰老,初步验证了CARTPT在血管衰老中所起的作用.
