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胶原酶消化加组织块法文献资料
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人黄韧带细胞体外原代培养方法的比较
目的 比较不同的人黄韧带细胞(LFCs)原代培养方法,优化培养条件,提高培养成功率.方法 采集成年腰椎间盘突出症患者后路椎间盘摘除术中的黄韧带,分别采用组织块法、酶消化法、胶原酶消化加组织块法体外原代培养LFCs,传代培养;倒置相差显微镜下观察细胞从组织块内迁出时间、细胞形态和生长状态;四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)测定其吸光度(OD)值,评价细胞增殖状况,绘制细胞生长曲线;用免疫荧光染色法检测传3代细胞的波形蛋白和Ⅰ型胶原的表达.结果 胶原酶消化加组织块法中组织块解离、贴附和细胞游出状况均优于单纯组织块法或单纯酶消化法,成功率较高.原代培养细胞的波形蛋白和Ⅰ型胶原免疫荧光染色呈阳性.结论 胶原酶消化加组织块法可提高LFCs原代培养的成功率.
关键词： 人黄韧带细胞 体外培养 胶原酶消化加组织块法
