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感染细胞蛋白22文献资料
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单纯疱疹病毒Ⅱ型感染细胞蛋白22在Vero细胞中的表达特性及其对细胞凋亡的影响
目的：通过单纯疱疹病毒Ⅱ型（HSV-2）感染细胞蛋白22（ICP22）真核表达质粒在Vero 细胞中瞬转表达以及放线菌素D诱导凋亡的方式研究ICP22对Vero细胞凋亡的影响。方法：将含有ICP22基因的重组质粒转染至Vero细胞后，经放线菌素D 诱导细胞凋亡，通过MTT法、Caspase3活性检测法检测细胞凋亡水平。结果：放线菌素D诱导处理48 h后，重组质粒组Vero细胞存活率为（0．860±0．110）％，Caspase3活性为（0．065±0．009）％。结论：在Vero 细胞中，ICP22可有效降低由放线菌素D 诱导的凋亡率，即ICP22可能具有抗细胞凋亡的作用。
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单纯疱疹病毒Ⅱ型ICP22真核表达载体的构建及其对Vero细胞活性的影响
目的 构建单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2)感染细胞蛋白22 (ICP22)真核表达载体pEGFP-C2/ICP22并研究其对非洲绿猴肾细胞(Vero)细胞活性的影响.方法 经双酶切实验和测序验证,以Xfect为介导将构建的真核表达载体pEGFP-ICP22转染至Vero细胞,并通过反转录PCR (RT-PCR)和绿色荧光检验其在细胞中的表达,后以MTT法检测细胞活性.结果 48 h后观察,发现转染重组质粒组细胞经RT-PCR验证有目的基因的转录,并通过荧光显微镜观察到融合蛋白表达.而空白质粒组只检测到荧光蛋白但未检测到目的基因转录本,且对照组未检测到荧光蛋白表达.转染重组质粒的细胞相对活性值为(82.39±6.44)％.结论 成功构建了pEGFP-ICP22真核表达载体,实现了其在Vero中的表达,融合蛋白GFP-ICP22明显降低了细胞活性.为进一步探讨HSV-ⅡICP22的功能和HSV-Ⅱ潜伏复发机制奠定了实验基础.
