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半孔糖-聚乙二醇-聚乙烯亚胺/小干扰核糖核酸质粒文献资料
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Gal-PEG-PEI/psiRNA肝靶向性纳米基因载体对人胎肝细胞系L-02细胞的转染效率检测
目的:检测半乳糖-聚乙二醇-聚乙烯亚胺/小干扰RNA质粒(Gal-PEG-PEI/psiRNA)肝靶向性纳米基因载体对人胎肝细胞系L-02细胞的转染效率.方法:合成Gal-PEG-PEI/psiRNA纳米复合物,采用纳米粒径仪测定复合物的粒径和zeta电位,用不同Gal-PEG-PEI氨基与siRNA磷酸基比例(N/P)的Gal-PEG-PEI/psiRNA纳米复合物转染L-02细胞,以Lipofectamine 2000、非靶向性载体PEG-PEI/psiRNA和裸siRNA转染为对照组,48 h后用流式细胞仪测定转染效率.转染前加入1 mg半乳糖观察其半乳糖竞争拮抗结果.结果:Gal-PEG-PEI/psiRNA纳米复合物的粒径随N/P增大而减小,N/P≥1/15时达小粒径,约为80 nm.Gal-PEG-PEI/psiRNA纳米基因载体的转染率为(20.4±0.9)％,明显高于非肝靶向性载体PEG-PEI/psiRNA(P＜0.01)及裸psiRNA (P ＜0.01),但低于Lipofectamine 2000(P＜0.05)；加入竞争性拮抗剂半乳糖后GaI-PEG-PEI/psiRNA纳米基因载体的转染率下降至(4.8±2.1)％,PEG-PEI/psiRNA介导的转染率则不受影响.结论:Gal-PEG-PEI/psiRNA纳米基因载体可明显提高人胎肝细胞系L-02细胞的转染效率,且具有良好的肝细胞靶向性.
关键词： 靶向性 纳米 半孔糖-聚乙二醇-聚乙烯亚胺/小干扰核糖核酸质粒 转染
