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果蝇表达系统文献资料
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人分泌性白细胞蛋白酶抑制剂在果蝇细胞中的稳定表达及鉴定
目的：在果蝇S2细胞中表达人分泌性白细胞蛋白酶抑制剂（ SLPI ）并对其生物学性质进行初步测定。方法以A549细胞RNA为模板，利用反转录PCR方法扩增得到SLPI蛋白的编码序列，并将其克隆到表达载体pMT/V5-His A中，构建pMT/V5-SLPI 表达质粒，通过与抗性筛选质粒pCoHygro 共转染S2细胞，经潮霉素B筛选3～4周，得到能够稳定表达SLPI蛋白的多克隆细胞系。经CuSO 4诱导表达后，用RT-PCR及Western blot分析SLPI基因的转录和表达。结果获得了抗性稳定的多克隆S2细胞株S2/SLPI，CuSO4诱导后，RT-PCR证明SLPI在S2/SLPI细胞中能高效转录，Western blot 在细胞培养上清中检测到表达的重组SLPI蛋白。结论在果蝇S2细胞中成功表达了人SLPI，SLPI的成功表达为进一步开展SLPI促进免疫应答及其在抗病毒感染等方面的作用研究提供了重要基础。
关键词： 分泌性白细胞蛋白酶抑制剂 果蝇表达系统 稳定表达
