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  • 细粒棘球蚴14-3-3重组疫苗免疫小鼠T淋巴细胞差异蛋白质组分析

    作者:李宗吉;赵巍

    目的:用蛋白质组学方法分析细粒棘球蚴(Eg )14‐3‐3重组疫苗免疫小鼠和磷酸盐缓冲液(PBS )注射小鼠 T淋巴细胞表达的蛋白质组,建立差异表达蛋白谱。方法以Eg14‐3‐3重组疫苗免疫小鼠为实验组,PBS注射小鼠为对照组,Eg14‐3‐3重组疫苗免疫2周后提取两组小鼠脾脏T淋巴细胞总蛋白,双向电泳(2‐DE)分离总蛋白,比较两组小鼠 T 淋巴细胞的差异表达蛋白质。结果凝胶电泳发现11个存在明显差异的蛋白质点,其中7个蛋白明显见于实验组小鼠 T淋巴细胞中,4个点明显见于对照组小鼠中。结论14‐3‐3重组疫苗免疫小鼠与PBS注射小鼠T淋巴细胞表达蛋白质组有明显差异,差异表达蛋白对疫苗免疫机制的研究及后续的疫苗优化具有重要意义。

  • 细粒棘球蚴Eg14-3-3 重组疫苗诱导小鼠细胞因子的动态观察

    作者:李宗吉;赵巍

    目的 观察重组疫苗Eg14-3-3免疫后及厡头蚴攻击感染后不同阶段6种细胞因子的动态变化,在分子水平上研究重组疫苗的免疫学机制.方法 研究采用rEg14-3-3和PBS分别免疫两组ICR小鼠,每隔两周免疫1次,在第3次免疫后4周,活的原头蚴攻击感染,在免疫后和攻击感染后不同时间静脉采血分离血清,ELISA法对血清中IL-2、IFN-γ、TNF-α、IL-4、IL-5、IL-10水平变化进行检测.结果 rEg14-3-3组小鼠6种细胞因子水平在免疫后和感染后高于PBS对照组,其中Th1类细胞因子IL-2、IFN-γ、TNF-α水平在第10周(急性感染期)达到峰值,30周后(感染慢性期)迅速降低并较长时间维持在高于免疫前水平,Th2类细胞因子IL-4、IL-5、IL-10免疫后水平相对无明显升高,在第18周后逐渐升高,30周达到峰值后逐渐降低,较长时间维持在相对较高水平;PBS组Th1类细胞因子在感染前无明显升高,原头蚴攻击感染后迅速升高,在第18周达到峰值后逐步降低,在相对较长时期维持相对较高水平.Th2类细胞因子IL-4、IL-5、IL-10维持在较低水平,攻击感染后水平缓慢升高,IL-4在18周达到峰值后降低并长期维持相对较高水平,IL-5、IL-10在第30周水平达到峰值后逐步降低并长期维持相对较高水平.结论 rEg14-3-3可诱导有效的Th1型细胞介导的细胞免疫和Th2型细胞介导的体液免疫,两种反应共同参与重组疫苗诱导的免疫保护作用.

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