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穿刺引流液文献资料
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穿刺引流液中病原性真菌的ITS测序研究
目的：探讨内部转录间隔区（ITS）测序用于快速检测穿刺引流液中病原性真菌的价值。方法采用临床常见的14种细菌和4种真菌及人类基因组DNA验证真菌通用引物（ITS1/ITS4和ITS3/ITS4）的特异性和敏感性；采集90例临床疑似真菌感染患者的穿刺引流液标本10 mL，其中8 mL 用于常规真菌培养，剩余2 mL 用于提取真菌 DNA 并分别用 ITS1/ITS4和ITS3/ITS4作为引物进行扩增，将阳性扩增产物测序并与BLAST比对，将测序法与培养法的阳性率结果进行统计学比较。结果14种细菌及人类基因组扩增产物均为阴性，4种真菌扩增产物为阳性。ITS3/ITS4和 ITS1/ITS4的低检测限分别为102 CFU/mL和103 CFU/mL。90例标本培养阳性率为4．44％（4/90），测序法阳性率为12．22％（11/90），二者差异具有统计学意义（P＜0．05）。结论引物ITS1/ITS4和ITS3/ITS4的特异性良好，后者较前者扩增敏感性更高；测序真菌ITS区可作为临床快速检测穿刺引流液中病原性真菌感染的方法。
