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固定破膜文献资料
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4种固定破膜试剂盒检测人调节性 T 淋巴细胞的结果比较
目的 比较4种固定破膜试剂盒检测人调节性 T淋巴细胞的效果.方法 选择CD4、CD25和叉状头转录因子3(Foxp3)3种抗体建立流式调节性T淋巴细胞检测方案.采集10例健康人的新鲜外周血分离单个核细胞 ,先标记膜表面抗体CD4与CD25 ,再分别用BD Pharmingen、eBioscience、Invitrogen及Beckman Coulter 4种的固定破膜试剂盒对细胞固定破膜 ,后标记Foxp3抗体上机检测.结果 与未固定破膜的相应样品比较 ,4种试剂盒均对细胞的形态有较明显的影响 ,但对膜表面抗体CD4和CD25的表达没有明显影响.采用eBioscience固定破膜试剂检测调节性 T 淋巴细胞(CD4+ CD25+ Foxp3+ )的比例为(8 .22 ± 2 .75)% ;Beckman Coulter为(0 .54 ± 0 .48)% ;BD Pharmingen为(0 .69 ± 0 .33)% ;Invitrogen为(0 .41 ± 0 .24)% .结论 4种试剂盒的固定效果相近 , eBioscience固定破膜试剂盒对胞内Foxp3具有较好的检测效果 ,更适合用于检测调节性T淋巴细胞.
