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血清肿瘤标志物联合检测在胰腺癌诊断中的应用
目的 探讨血清肿瘤标志物联合检测在胰腺癌诊断中应用价值.方法 对2008年1月至2010年12月收治的64例胰腺癌患者及64例健康体检者进行了血清肿瘤标志物癌胚抗原(CEA)、糖类抗原199(CA199)和细胞角蛋白19(CK19)片段的检测,并分析其检查结果.结果 血清肿瘤标志物单项检测CEA、CA199与CK19的敏感度各为49.2%、69.8%和76.1%,特异性各为68.9%、79.6%和85.4%;联合检测敏感度为95.2%,特异性为99.8%;胰腺癌患者CEA、CA199与CK19水平较健康体检者高,差异有统计学意义(P<0.01).结论 血清肿瘤标志物联合检测可以较准确地对胰腺癌进行早期诊断,在敏感度及特异性方面优于单项检测,为胰腺癌诊治提供了指导,有很高的临床应用价值.
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重组人细胞角蛋白9cDNA的原核表达及纯化
目的 克隆人细胞角蛋白CK9的cDNA,通过原核表达系统表达融合蛋白并进行纯化和鉴定.方法 从人角质形成细胞系(HaCaT)中提取RNA,以RT-PCR反转录cDNA,使用特异性引物PCR扩增出人CK9编码区全长并克隆到pET-28a载体上,再用IPTG诱导融合蛋白his-CK9的表达.表达的融合蛋白通过Ni2+亲和层析纯化后,进行SDS-PAGE和Western blot鉴定.结果 测序鉴定构建表达载体中CK9的cDNA序列正确;融合蛋白his-CK9可在大肠杆菌中诱导表达;纯化的融合蛋白his-CK9纯度较高;纯化的融合蛋白his-CK9可与商品化CK9抗体特异性结合.结论 成功构建原核表达载体pET-28a-CK9,并成功诱导及纯化融合蛋白his-CK9.