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环介导等温扩增技术研究进展
环介导等温扩增技术(LAMP)是一种核酸扩增技术,该方法大的优点是能够在63℃~65℃的等温条件下扩增特定DNA序列,并在30~60 min内可以观察到结果.LAMP已经成功用于许多病毒的检测,本文主要概述与LAMP技术相关的新发展现状,以及国外应用该技术检测食物致病菌、动物病毒、临床微生物等方面进展.LAMP作为一种快速、简便、灵敏、特异,无需贵重检测设备而易普及的检测技术,在一些基层实验室、流行病学调查和检验检疫等领域具有广阔的应用前景.
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基于金属增强荧光的高通量碱基突变的筛查
目的 开发简单特异的金属增强荧光方法以区分含突变位点和完全互补配对的核酸序列.方法 靶标能通过toehold调节的链置换反应将固定在96孔板表面的发卡结构核酸打开,再加入5'端修饰了羧基荧光素的信号探针,该探针能与另一段打开的捕捉探针杂交,通过检测荧光信号实现对靶标的分析.结果 相对于一般方法,金属增强荧光(MEF)能明显区分互补配对靶标和含突变靶标,并具有有显著的信号放大作用(对于100 nmol/L的靶标,信号放大~13倍),能检测出0.1 nmol/L级别的靶标(普通方法5 nmol/L).结论 为核酸突变检测提供了一种简便高通量的初筛手段.