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环介导等温核酸扩增文献资料
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基于LAMP技术的微全分析仪在口岸传染病检测中的应用前景
本文总结了现有传染病检测方法在口岸应用中的不足,介绍了微全分析仪和环等温扩增技术(LAMP)在病原体检测中的应用,从样本提取、环境要求、检测时限、结果判读等方面探讨了开发基于LAMP的微全分析仪在口岸疑似传染病筛查中的应用进行了探讨,为防范外来重大传染病的入侵,进一步增强口岸检验检疫能力提供参考.
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两种快速鉴定甘草方法的比较
目的:建立快速检测中药材甘草的荧光定量PCR和环介导等温核酸扩增(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)两种技术,并对它们的特异性和灵敏性进行比较.方法:以中药材甘草作为实验对象,提取DNA后,用设计的PCR引物及LAMP引物组合分别对甘草进行普通PCR、荧光定量PCR以及LAMP实验,检测引物的特异性,同时建立模板DNA的浓度梯度,对荧光定量PCR及LAMP的灵敏性进行检测.结果:甘草的特异性序列可以通过荧光定量PCR得到有效扩增,而与甘草相近的混伪品结果显示阴性.荧光定量PCR低可检测到甘草的浓度为0.67×10-4ng/μL.在LAMP特异性检测中,甘草出现浊度值,其他混伪品显示阴性.灵敏度性检测中,LAMP检测在60 min反应时间内同样检测到的甘草的低DNA浓度为0.67×10-4 ng/μL,反应产物加入荧光染料SYBR Green Ⅰ后反应液呈现肉眼可观察的明显的亮绿色.结论:LAMP检测和real-time PCR检测具有相似的特异性、灵敏度和精确性,但LAMP检测方法更为简单、方便,所需时间更短,而且不需要昂贵的仪器.因此,LAMP检测中药的方法更适合于对中药材甘草检测的推广使用.
