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  • 应用滚环扩增研究肝癌组织中的HBV cccDNA

    作者:罗璇;龙泉鑫;黄爱龙;胡源

    目的:运用滚环扩增(rolling circle amplification,RCA)分离肝癌患者组织中乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)共价闭合环状DNA(covalently closed circular DNA,cccDNA),研究pre-S区的缺失.方法:对RCA技术的特异性和灵敏度进行了研究,并应用该技术扩增13对癌组织和癌旁组织中HBV cccDNA,对pre-S区的缺失进行了研究.结果:RCA能够高效,特异的扩增组织中10拷贝/μl HBV cccDNA;26例样本中,22例样本的HBV cccDNA能够被RCA撤增测序,其中有8例样本(8/22,36.4%)在pre-S区域存在着缺失,pre-S2缺失比例高于pre-S1(8/8 vs.2/8,P=0.007).结论:首次发现肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织中HBV cccDNA存在着pre-S区的缺失,有助于深入理解cccDNA pre-S区缺失与HCC的关系.

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