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γ-氨基丁酸通过其B受体影响小鼠植入前胚胎的发育
目的:探讨γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)对小鼠植入前胚胎发育的影响及其机制.方法:①收集不同发育阶段的小鼠植入前胚胎,通过激光共聚焦检测GABA及其B受体B1亚基(B receptor B1 subunit,GB1)、A受体pi亚基(A receptor pi subunit,GABRP)以及GABA合成酶(L-glutamate decarboxylase,GAD67)的表达.②不同发育阶段的胚胎分别培养在含10,20,30,40,50 μg/μL GABA和40 μmol/L B型受体抑制剂(3-Amino-2-(4-chlorophenyl)-2-hydroxypropanesulfonic acid,2-hydroxysaclofen)的培养液中,48～72 h时观察囊胚的形成并计算囊胚形成率.结果:①GABA与其受体GB1蛋白在小鼠胚胎中的表达模式一致,在2-细胞和4-细胞阶段,主要表达在细胞膜上,而在8-细胞至囊胚阶段,则转移到细胞核中表达;而另一受体GABRP在植入前胚胎的各个阶段均不表达.GAD67在胚胎发育的各个阶段均有表达.②各发育阶段胚胎的囊胚形成率均随着GABA浓度的增加而下降,且呈剂量依赖性;10μg/μL GABA可显著降低2-细胞胚胎的囊胚形成率(92％ vs.99％,x2=5.70,P=0.035).③40 μmol/L 2-hydroxysaclofen能够有效逆转30 μg/μL和40μg/μL GABA对囊胚形成的抑制作用(99％ vs.45％,x2=72.32,P=0.000;99％ vs.4％,x2=180.66,P=0.000).结论:GABA通过其B受体抑制小鼠植入前胚胎的发育.
关键词： γ-氨基丁酸 植入前胚胎 2-hydroxysaclofen 囊胚形成
