您当前的位置：
首页 > 文献资料
所属专业：
脱细胞膀胱文献资料
-
UBM材料上的Laminin蛋白促进负载骨髓间充质干细胞增殖和平滑肌分化
目的 探讨猪膀胱细胞外基质(urinary bladder matrix,UBM)上的Laminin蛋白对大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)增殖和向平滑肌分化的影响.方法 采用机械分离法、酶消化法及冷冻干燥法等方法对新鲜猪膀胱进行脱细胞处理,采用蛋白与支架共孵育,制备出UBM+Laminin及UBM+Anti-Laminin复合支架.采用贴壁法培养BMSCs,流式细胞仪鉴定BMSCs.采用P3代BMSCs,分别接种于UBM+Laminin、UBM及UBM+Anti-Laminin上.采用CCK-8检测、HE染色观察及免疫组化鉴定等方法检测Laminin蛋白对BMSCs增殖、迁移和分化的影响.结果 流式细胞仪鉴定BMSCs CD29阳性表达率为98％,CD31阳性表达率为4.56％,CD34阳性率为3.30％.3种材料均能支持BMSCs生长,且随共孵育时间的延长,D(450)值逐渐升高,其中UBM+Laminin复合材料组细胞D(450)高(P＜0.01).HE染色结果显示UBM+ Laminin组细胞接种第3天形成黏附层,并向深部迁移,第14天可达材料致密层;UBM组第7天仅少许细胞向深层迁移,第14天未达基底层;UBM+Anti-Laminin组仅在支架表层生长.免疫组化检测显示UBM+Laminin组、UBM组、UBM+ Anti-Laminin组细胞α-SMA表达分别呈阳性、弱阳性和阴性.结论 UBM材料上Laminin蛋白能促进负载BMSCs增殖、迁移、并有诱导其向平滑肌方向分化的作用.
