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肌动蛋白结合域文献资料
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PTD-ABD融合蛋白对髓系白血病细胞的增殖和凋亡的影响
目的 研究癌基因BCR/ABL C末端肌动蛋白结合域(actin-binding domain,ABD)蛋白对白血病细胞增殖和凋亡的影响.方法 构建含有ABD基因的重组表达载体,应用蛋白转导结构域(protein transduction domain,PTD)将蛋白转入白血病细胞内,应用Westem blot与免疫荧光法确定蛋白是否进入白血病细胞,然后分别应用流式细胞仪及MTT法检测融合蛋白对白血病细胞凋亡及增殖的影响.结果 成功构建PTD-ABD融合表达载体,获得高纯度PTD-ABD融合蛋白.同时构建PTD表达载体并获得高纯度表达蛋白.将PTD、PTD-ABD蛋白与白血病细胞K562、HL60共培养,Westernblot与免疫荧光法确定PTD、PTD-ABD蛋白成功进入细胞内.与阴性对照比较,PTD-ABD蛋白能显著抑制HL60细胞的生长,并且对HL60细胞的凋亡具有明显的促进作用,差异具有统计学意义(P＜0.05),但对K562细胞的增殖及凋亡无影响(P＞0.05);PTD蛋白对K562、HL60细胞的增殖及凋亡无影响,与阴性对照比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 PTD转导的ABD蛋白抑制HL60细胞的增殖,并诱导细胞凋亡.
