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聚己内酯/胶原支架纳米纤维方向对小鼠成骨前体细胞形态、增殖和分化的影响
目的 探讨聚己内酯/胶原(PCL/COL)支架纳米纤维方向对小鼠成骨前体细胞(MC3T3-E1)形态、增殖、分化的影响.方法 通过扫描电子显微镜(SEM)对非取向和取向的PCL/COL纳米纤维支架的形貌进行观察；将MC3T3-E1细胞接种在非取向与取向的PCL/COL纳米纤维支架上,通过SEM及激光共聚焦显微镜(LSCM)观察细胞在两组材料上的生长形态,CCK-8法检测细胞在两组材料上的增殖情况,Real-time RT-PCR检测细胞在两组材料上成骨分化的功能性基因Ⅰ型胶原(COL Ⅰ)、碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(OCN)的表达情况.结果 非取向PCL/COL纳米纤维支架的纤维方向无规则,取向PCL/COL纳米纤维支架的纤维方向相同,两者纤维直径差异无统计学意义(P＞0.05),分别为(586±239) nm和(625±155)nm;SEM及LSCM检测结果显示MC3T3-E1细胞在非取向的纳米纤维上呈星形生长,细胞骨架呈不规则形态,而在取向纳米纤维上呈扁长形生长,且细胞骨架沿纳米纤维方向整齐排列；CCK-8检测结果显示在1、3、5d和7dMC3T3-E1细胞在非取向与取向PCL/COL纳米纤维支架上的增殖率比较差异无统计学意义(P＞0.05)；Real-time RT-PCR检测结果显示MC3T3-E1细胞在两组材料上COLⅠ表达水平比较差异无统计学意义(P＞0.05),而细胞在非取向组较取向组能表达更多的ALP和OCN,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 非取向和取向的PCL/COL纳米纤维支架均能提供一个良好的微环境,利于MC3T3-E1细胞的生长、增殖,同时非取向PCL/COL纳米纤维支架较取向PCL/COL纳米纤维支架更有利于MC3T3-E1细胞的成骨分化,是一种有应用前景的骨组织工程支架材料.
关键词： 聚己内酯/胶原 纳米纤维 MC3T3-E1细胞 方向
