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阻断TGF-β/TGF-βRⅠ通路对ATDC5细胞增殖、分化及细胞外基质的影响
目的 研究转化生长因子βⅠ型受体(transforming growth factor beta type Ⅰ receptor,TGF-βR Ⅰ)阻断剂SB-505124对软骨细胞增殖、分化及细胞外基质的影响与机制.方法 利用Western blot检测不同浓度的SB-505124处理后,前软骨细胞系ATDC5中p-Smad2/3的变化.MTT法检测SB-505124处理对ATDC5细胞生长、增殖的影响及时间、浓度依赖性效应.Western blot检测c-Myc蛋白水平的变化.Real-time PCR检测SB-505124处理后软骨分化、细胞外基质合成及降解相关分子CollagenⅡ、Aggrecan及Adamts5表达与变化,并利用阿尔新蓝染色法检测SB-505124处理对ATDC5细胞中蛋白聚糖合成的影响.结果 Western blot检测结果示:SB-505124处理ATDC5细胞明显抑制TGF-β1激活的p-Smad2/3,并呈浓度依赖性;MTT检测结果示:SB-505124浓度和时间依赖性的抑制ATDC5细胞增殖;Real-time PCR检测结果示:SB-505124处理明显抑制ATDC5细胞中CollagenⅡ、Aggrecan的表达,同时上调了Adamts5的表达;阿尔新蓝染色结果提示SB-505124处理明显抑制ATDC5细胞中蛋白聚糖的合成.结论 利用SB-505124阻断内源性TGF-β信号,可抑制软骨细胞增殖、分化及细胞外基质的合成,同时促进细胞外基质的降解.
关键词: 转化生长因子βⅠ型受体 SB-505124 ATDC5 细胞增殖 细胞外基质