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SFRF2文献资料
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免疫共沉淀-蛋白测序技术验证Periostin和SFRP2之间的相互作用
目的 验证凋亡相关蛋白基因SFRP2(secreted frizzled-related protein 2)和骨母细胞特异性因子-2 Periostin(osteoblast-specific factor 2)间的相互作用.方法 分别构建重组载体pCMV-Myc-SFRP2和pCMV-HA-Periostin经双酶切鉴定正确,共转染HEK293细胞,抗Myc单克隆抗体沉淀Myc-SFRfr2相互作用蛋白复合物后,进行SDS-PAGE、考马斯亮蓝染色,切下目的条带,利用HPLC-Chip/MS纳流液质联用技术进行肽序列分析,经Spectrum Mill搜索Swissport数据库后鉴定蛋白质.结果 经HPLC-Chip/MS纳流液质联用技术分析,免疫沉淀复合物内可检测出Periostin的表达.结论 Peri-ostin与SFRP2间存在相互作用.