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Linc00238在乙型肝炎病毒复制中的调控作用
目的 探讨长链非编码RNA00238 (long intergenic non-coding RNA 00238,Linc00238)在乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)复制中的调控作用及其可能机制.方法 利用LincRNA芯片比较HBV(+)与HBV(-)肝组织样本中HncRNA表达的差异,根据芯片检测结果,终选择Linc00238为研究对象.Real-time PCR验证Linc00238表达;利用过表达及RNA干扰,检测Linc00238对HBV复制、转录以及表达的影响.利用双荧光素酶报告系统检测Linc00238对HBV启动子活性的影响.结果 HncRNA芯片在HBV(+)组织中共发现13条HncRNA表达发生变化,其中2条上调,11条下调,Real-time PCR进一步证实Linc00238在HBV(+)肝组织样本中的表达明显降低,在HBV稳定表达细胞系HepG2.2.15、HepAD38及HBV瞬时转染细胞模型中同样发现Linc00238表达下调,提示HBV感染抑制Linc00238表达.过表达Linc00238后,HBV复制及蛋白表达明显降低(P<0.05),引入sh00238干扰Linc00238表达后,HBV复制及蛋白表达恢复(P>0.05);双荧光素酶报告系统显示:HepG2细胞共转染pHBs-luc、pHBx-luc、pHBc-luc及pCDNA-linc00238后的荧光素酶活性与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 Linc00238对HBV蛋白及DNA表达具有抑制作用,但不能通过影响HBV启动子活性抑制HBV的表达与复制.
关键词: 乙型肝炎病毒 长链非编码RNA00238 荧光素酶报告基因