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代谢标记文献资料
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肠粘蛋白Muc3羧基末段翻译后蛋白酶切片段间的相互连接
目的探讨大鼠Muc3羧基端在翻译后经历蛋白酶切所产生的两个酶切片段的存在方式.方法肠粘蛋白Muc3羧基末端的表达采用体外的瞬时表达系统,表达的蛋白质采用Western blotting检测,两个酶切片段的连接鉴定采用示踪/追踪(pulse/chase)及其免疫沉淀实验和His.Bind镍树脂亲和纯化方法.结果 Muc3羧基末端在翻译后经蛋白酶切产生分子质量为49 000和分子质量为30 000的两个片断,尚有少量分子质量为55 000的未被酶切的全长产物.酶切发生在该蛋白生物合成的内质网阶段,两个酶切片段通过非共价键及SDS敏感的相互作用连接在一起.结论这种早期的蛋白酶切反应可能是其细胞表面的很大的细胞外成分终脱离的前奏,但是两个酶切片段锚定在细胞膜上的相互作用是影响细胞外成分终脱离的重要因素.
