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pBS/U6/STAT3-siRNA文献资料
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小鼠STAT3基因干扰质粒的构建及其效果鉴定
目的构建小鼠STAT3基因的特异性RNA干扰质粒,并鉴定其在细胞水平的抑制效果.方法采用DNA载体介导的RNA干扰技术构建小鼠STAT3基因的特异性RNAi质粒(pBS/U6/STAT3-siRNA),并通过RT-PCR、免疫印迹、免疫细胞化学染色等技术对pBS/U6/STAT3-siRNA的抑制效率进行鉴定.结果经双酶切鉴定筛选出4个阳性干扰质粒,分别转入293T细胞后均可明显降低STAT3的表达,尤以靶向(+2 334～+2 351)位点的质粒干扰效率高,达70%.结论小鼠STAT3基因的特异性干扰质粒(pBS/U6/STAT3-siRNA)能从蛋白及mRNA水平上特异和高效地抑制STAT3基因的表达.这种DNA载体介导的双链RNA干扰质粒为进一步探究STAT3与胚胎发育的相关功能提供一种有效的研究工具.
关键词： pBS/U6/STAT3-siRNA STAT3 RNAi 小鼠
