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ELC文献资料
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人趋化因子ELC的克隆与表达
目的克隆人趋化因子ELC基因,表达并初步纯化ELC融合蛋白.方法从扁桃体中提取总RNA,再进行RT-PCR,扩增ELC成熟蛋白基因,并在5′和3′分别添加NcoⅠ和EcoRⅠ酶切位点,通过这两个酶切位点重组于pET32a(+)载体上,转化E.coli DH5α,筛选阳性克隆,酶切鉴定,DNA测序检测插入序列的正确性,缺失突变获得ELC天然蛋白表达载体pET32a(+)/ELC,SDS-PAGE分析其表达,Western blot验证融合蛋白.大量表达并初步纯化ELC融合蛋白.结果成功克隆了ELC基因,表达并初步纯化得到ELC融合蛋白.结论构建的ELC硫氧还蛋白融合表达载体以可溶性蛋白的方式表达ELC硫氧还蛋白.
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CCR7-SLC/ELC生物学轴对乳腺癌细胞趋化及侵袭活性的影响
目的 探讨CCR7-SLC/ELC生物学轴对乳腺癌细胞株MCF-7的趋化及侵袭活性的影响.方法 用Boyden趋化小室测定外源性趋化因子SLC、ELC对MCF-7趋化及侵袭活性的影响.用Westen-Blot法检测所取新鲜乳腺癌转移淋巴结标本中SLC、ELC的表达情况.取转移淋巴结组织匀浆上清液代替外源趋化因子,测定其对MCF-7趋化及侵袭活性.同时测定使用SLC、ELC单克隆抗体后趋化及侵袭活性的改变.结果 不论是外源性SLC、ELC还是转移淋巴结的蛋白上清液均能增加MCF-7趋化及侵袭活性.SLC、ELC单克隆抗体的封闭能明显抑制其活性.结论 CCR7-SLC/ELC 生物学轴增加乳腺癌细胞的趋化和侵袭活性,可能参与乳腺癌的亲嗜性淋巴结转移.
