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  • 抗心肌肥大多肽GCIP表达载体的构建

    作者:周见至;李晓辉;张海港;唐渊;王晓芹

    目的化学合成DNA片段后利用基因工程技术,克隆入含有T7启动子的原核表达质粒.方法采用分二段化学合成G蛋白竞争性抑制肽(G-protein competed inhibition of peptide, GCIP)基因的方法,酶切后先定向克隆到pEGFP-N1质粒中,再用XhoⅠ和SmaⅠ切下含完整基因的片段,插入XhoⅠ和SmaⅠ处理的pIVEX2.3-MCS质粒,构建能在E coli BL21(DE3)pLysE和RTS500系统中表达的质粒.经转化DH5α大肠杆菌,筛选出阳性转化子,并用酶切及测序鉴定.结果通过基因工程技术,构建了pIVEX2.3MCS-GCIP表达质粒,经测序鉴定结果与设计的完全相符.结论成功构建了GCIP的重组表达质粒.

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