您当前的位置：
首页 > 文献资料
所属专业：
人源氨基末端脂多糖结合蛋白文献资料
-
重组人脂多糖结合蛋白的氨基末端片段在昆虫细胞中的表达、纯化及功能鉴定
目的以昆虫sf21、sf9细胞表达、分泌人源脂多糖结合蛋白的氨基末端片段(NH-LBP),并初步观察其生物学特性.方法以昆虫sf21和sf9细胞于完全Grace培养基中分别扩增编码人源NH-LBP的杆状病毒,再以sf21和sf9细胞于SF-900Ⅱ无血清培养基中表达NH-LBP,并以TALON柱芯对NH-LBP进行亲和纯化,此后以Tris-Tricine电泳、毛细管电泳、流式细胞分析实验(flow cytometry analysis)、TNFa分泌实验的方法鉴定NH-LBP的纯度及生物学活性.结果昆虫sf21和sf9细胞均能有效地扩增编码NH-LBP的杆状病毒,其中sf9细胞扩增病毒的能力为sf21细胞的1.18倍.sf21细胞成功地表达、分泌NH-LBP,并经TALON柱芯亲和纯化,其纯度达98%,NH-LBP具有明确的与脂多糖(LPS)结合的生物学活性,而sf9细胞却不能表达、分泌NH-LBP.结论以昆虫sf21细胞分泌表达具有活性人源NH-LBP是可行的,昆虫sf9细胞可扩增编码NH-LBP的杆状病毒,但不能表达、分泌NH-LBP.
关键词： 昆虫细胞 人源氨基末端脂多糖结合蛋白 无血清培养基 杆状病毒
