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TRAIL(肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体)文献资料
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TRAIL蛋白的表达、纯化和抗肿瘤活性
目的利用大肠杆菌表达出TRAIL蛋白,并观察分离纯化后的TRAIL蛋白的抗肿瘤活性.方法采用CaCl2法将带有TRAIL(氨基酸114-281,含六聚组氨酸尾)基因的pET-d质粒转入大肠杆菌BL21(DE3)pLysS,IPTG诱导蛋白表达;使用Ni-NTA层析柱分离纯化蛋白,SDS-PAGE和Western blot法鉴定TRAIL蛋白的表达;MTT法检测TRAIL蛋白的抗肿瘤活性.结果我们分离纯化出分子量为20.1×103的蛋白,Western blot法证实为TRAIL蛋白,MTT法检测出其有较高的抗肿瘤活性,呈现出较好的时效和量效关系.结论成功地利用大肠杆菌表达、Ni-NTA层析柱分离纯化出具有抗肿瘤活性的TRAIL蛋白,并证明其具有抗肿瘤活性.
