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支气管上皮细胞株H292文献资料
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重组白细胞介素10-pEGFP-N2质粒构建及表达
目的 将IL-10基因定向克隆入pEGFP-N2质粒,探讨采用构建的质粒转染支气管上皮细胞H292株,稳定表达IL-10和荧光蛋白可行性。方法 采用定向克隆技术,将IL-10基因克隆入pEGFP-N2质粒,用构建成功的IL-10--pEGFP-N2质粒在Fuge-6介导下转染培养的支气管上皮细胞株(H292),利用免疫组化、RT-PCR检测细胞中IL-10蛋白和mRNA的表达,并在荧光显微镜下观察荧光蛋白表达。结果 ①重组后的pEGFP-N2质粒已成功载入IL-10基因。②IL-10--pEGFP-N2 质粒转染支气管上皮细胞H292株后,可在H292株内表达IL-10mRNA、IL-10蛋白和荧光蛋白。结论 重组的IL-10--pEGFP-N2质粒可在上皮细胞内表达IL-10和荧光蛋白。由于两者共用一个启动子,荧光蛋白表达可报告IL-10表达,适用于动物实验气道内的IL-10转基因研究。
关键词: 白细胞介素10 转基因 支气管上皮细胞株H292 荧光蛋白