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TNF-α对鼠根尖乳头干细胞增殖及多向分化能力的影响
目的 研究肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对鼠根尖乳头干细胞(SCAP)增殖及多向分化能力的影响.方法 采用酶消化法结合组织块法获得SCAP,将细胞分为实验组(TNF-α浓度为5、10、20、50 ng/mL)和对照组(TNF-α浓度为0 ng/mL),使用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测SCAP的增殖能力;采用茜素红染色及实时定量PCR(qRT-PCR)检测TNF-α对SCAP成骨/成牙本质能力的影响;油红O染色检测TNF-α对SCAP成脂能力的影响;qRT-PCR检测TNF-α对SCAP血管相关基因表达的影响.结果 体外培养SCAP符合间充质干细胞来源的特征且具有多向分化能力.MTT结果显示:与对照组相比,各浓度组均能促进SCAP增殖(P<0.05),其中10 ng/mL TNF-α的促进作用为明显.茜素红染色结果显示:实验组随着TNF-α浓度的增加,矿化结节逐渐变小,形成数量也逐渐变少.qRT-PCR结果显示:3、7 d时,与对照组相比,实验组骨钙蛋白(OC)、牙本质涎磷蛋白(DSPP)、牙本质基质蛋白-1(DMP-1)表达量降低,3 d时两组OC、DMP-1比较差异有统计学意义(P<0.05);7 d时DMP-1比较差异有统计学意义(P<0.05);14 d时,实验组OC、DMP-1表达量明显降低(P<0.05).油红O染色结果显示:与对照组相比,实验组随着TNF-α浓度的增加,脂滴形成数量逐渐减少.qRT-PCR结果显示:3、7天时,与对照组相比,血管生成素1、血管内皮生长因子A、血小板内皮细胞黏附分子-1表达量明显降低(P<0.05).结论 炎性因子TNF-α对SCAP的增殖有明显促进作用但同时不同程度抑制SCAP多向分化能力.
