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娄晋宁:做研究要锲而不舍
应用干细胞技术治疗糖尿病的研究,娄晋宁带领他的团队已经经历了将近7年多的漫长历程.近4年来,娄晋宁领导的团队已经实施了26例胰岛移植治疗糖尿病研究.他的团队从事的干细胞治疗糖尿病研究可以说是当今医学界前沿、热门、受瞩目的研究领域之一.由于理论体的不完善,技术手段的局限性等诸多未解难题以及伦理道德方面的争议,使得干细胞的研究一直处于既让人无限期待,又被人不断质疑的纠结之中.
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肝脏疾病干细胞治疗研究进展
各种类型的干细胞以其独特的模式在肝脏再生中发挥作用,这在许多报道中均已阐述.本文对当前广泛讨论的多种干细胞群体加以描述,试图将有关肝干细胞生物学方面不同的观点加以概括.本文重点阐述了用"细胞融合"而非"转分化"理论来解释肝脏再生的观点.并且认为在尝试干细胞对肝脏疾病进行临床治疗之前,尚有一系列未明确的问题需要进一步研究.
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041 多能干细胞--发育毒性研究的新思路
近年来多能干细胞引起了许多科学家的关注,在临床中已被作为一种基因治疗和细胞治疗手段广泛应用于多种难治之症的研究,如帕金森病、老年性痴呆、肿瘤以及器官移植等.同时,多能干细胞作为一种原始细胞具有旺盛的增殖、自我稳定能力和多向分化的潜能,因此,还可以作为一种新的测试细胞应用于环境因素致发育毒性的检测和机制研究.它的应用无疑为生殖发育毒理研究打开了一扇崭新的大门.
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065 干细胞在毒理学研究中的应用现状
随着对于细胞的研究不断深入，应用干细胞进行毒理学研究正受到国内外学者的普遍关注。利用干细胞实验模型进行毒物安全性评价和毒性机制研究有其不可替代的优势。用人干细胞直接评价环境因素对健康的影响，具有指标敏感、有利于研究更加深入的优点。因此本文就干细胞在毒理学研究中的应用现状进行综述。
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应用细胞治疗肝脏疾病研究进展
肝脏是人体大的内脏器官,占体重的2% ~ 5%,具有复杂的结构和生理功能(如分泌胆汁、代谢、解毒和凝血因子合成等). 据调查,肝脏疾病占世界总死亡因素的2.5%,且其发病率仍在逐年增高[1]. 肝移植是治疗各种终末期肝病有效的方法,然而供体来源紧张、手术创伤大、术后的免疫排斥反应以及昂贵的费用等缺点限制了肝移植技术的发展和临床应用. 因此,寻找新型的治疗方式已成为临床上急需解决的问题.干细胞是一类可高度增殖和具有多向分化潜能的细胞群体,这些细胞在一定条件下可分化成各种不同的组织细胞,来满足身体各个组织的需要. 干细胞的分离和体外培养技术日渐成熟,且干细胞移植有侵入性小、并发症少、技术简单、可重复使用等优点,细胞移植已成为治疗终末期肝病的研究热点. 目前,细胞移植已在临床开展用于治疗遗传代谢性肝病、急性肝衰竭等肝脏疾病,并成为等待原位肝移植患者过渡性治疗的方法之一[2-3]. 本文就近年来用于肝脏疾病治疗研究的移植细胞的来源、植入途径等方面进行综述.
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自体外周血干细胞移植联合EPO对猪急性心肌梗死心肌细胞凋亡的影响
目的:观察自体外周血干细胞移植联合促红细胞生成素对猪急性心肌梗死模型心肌细胞凋亡的影响.方法:选用中国小型猪32只,均采用经皮穿刺球囊封堵冠状动脉左前降支制备猪急性心肌梗死(AMI)模型,随机分为4组.干细胞(SC)组(n=8)给予粒细胞集落刺激因子(G-CSF)皮下注射连续7天,血细胞分离机单采外周血干细胞悬液(PBSC)后,通过经皮经腔导管技术建立的梗死相关动脉(IRA)通道回输；EPO组(n=8)AMI模型制作成功后1h经耳缘静脉给予EPO3000U/Kg,于相同时间给予等体积生理盐水；实验(SC+ EPO)组(n=8)同时给予EPO及干细胞移植干预,干预方法同上.另设对照组(n=8),以同样的方式输注等量生理盐水.4周后处死实验动物,取心肌梗死区域组织行苏木精-依红染色法(HE染色)观察病理组织改变；Western blot法检测各组心肌组织中凋亡蛋白Bax,Bcl-2及caspase-3的表达.结果:①组织学苏木精-依红染色结果:四组实验动物心肌组织样本中均可见心肌梗死区域,以对照组为严重,实验组病理改变弱.心肌梗死区域可见心肌细胞坏死崩解、组织结构破坏,梗死边缘区间大量炎性细胞浸润及新生毛细血管.②Western blot法检测结果:与对照组相比,其余三组Bcl-2蛋白表达含量均明显增高(P＜0.01),Bax及Caspase-3蛋白表达量均减低(P＜0.05).与SC组和EPO组相比,实验组心肌梗死猪心肌组织中抗凋亡蛋白Bcl-2的含量显著增高(P＜0.05)；凋亡蛋白Bax及Caspase-3的含量则显著降低(P＜0.05).结论:自体外周血干细胞移植联合EPO治疗急性心肌梗死优于单独使用其中一种方式,通过抑制梗死区域心肌细胞的凋亡,有效防止梗死后左室重构,明显改善心功能.
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中医药治愈断指再植创口内可寄存大量异物
目的:研制成功纯中药极效生肌散,依中医煨脓长肉理论和现代分子生物学理论治愈了大量包括皮肤癌在内的高难度创(烧)伤,特别是能克隆性治愈一例女性会阴部一系列组织器宫全失的患者,凸现出中医特有的超前思维和创新精神.感悟到:要使人们心悦诚服地接受和推崇中医治伤的科学性,必须用分子生物学理论才能把中医精髓解释清楚.在此基础上愿做甩掉抗生素和克隆式治伤的领跑人.方法:本药一经用于临床便发现有四效(速效、高效、长效和多效).1992年年底《健康报》披露了煨脓长肉已被现代科技所证实后、已将我们的研究导入现代分子、细胞生物医学范畴,找到了中西医理论的契合点,本药和人体血液接触后,激活了血液中的潜能再生细胞(PRCS),产生了骨髓间质干细胞(ES)和多种细胞生长因子(R.GF)在干细胞和多肽的作用下,不但断指再植后伤口能迅猛愈合,原创口内之异物凝结成环状物,而暂时寄存起来,基本上不影响创口愈合.结果:本病例一次治愈.结论:创口内虽有大量异物,对生理愈合影响不大.
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干细胞技术的概况及在肝脏疾病方面的应用
干细胞是存在于胚胎和成体中的一类特殊细胞,它能长期地自我更新,在一定的条件下具有分化形成多种终端细胞的能力[1].作为一种尚未分化的未成熟细胞,它有分化形成各种组织的功能,故在医学界称其为"万用细胞"[2].对于促进生命科学与临床医学发展的作用不言而喻.本文围绕干细胞的概述及研究进展,发展前景以及干细胞技术在肝脏疾病的应用等三个方面进行阐述.
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详述手术切除后局部应用丝裂霉素C联合羊膜、角膜缘干细胞移植治疗翼状胬肉的临床分析
目的:探讨翼状胬肉的临床治疗效果.方法:将我院收治的翼状胬肉患者随机分为治疗组和对照组,分别行术后局部应用丝裂霉素C联合羊膜、角膜缘干细胞移植,和自体角膜缘干细胞移植.结果:治疗组术后复发2例(3只眼),对照组术后复发10例(14只眼).结论:恰当的手术治疗翼状胬肉,可减少术后复发率.
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撕剥翼状胬肉联合角膜缘干细胞移植治疗翼状胬肉
目的:通过对病例的分析讨论,探讨撕剥翼状胬肉联合角膜缘干细胞移植术的治疗方法和效果.方法:回顾患者治疗资料,分析40例实施撕剥角膜翼状胬肉联合角膜缘干细胞移植术进行治疗的患者的术后预后情况.观察患者手术创面的修复以及移植物的存活情况.结果:术后对患者进行随访,患者均有不同程度的术后反应,其中以结膜充血及分泌物增多,眼球粘连,移植片水肿为主,术后反应在术后十天后均有不同程度的缓解.对患者进行长期随访调查,40例患者中,36例患者移植片存活良好,4例患者有胬肉复发的迹象.总体复发率为10％结论:通过分析,我们认为,对患者实施撕剥翼状督肉联合角膜缘干细胞移植术可以明显的改善患者的病情,并且可以促进角膜缘干细胞功能的恢复,重建眼表功能,降低患者术后胬肉的复发率,提高患者生活质量.
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干细胞向女性生殖细胞分化的研究进展
人类辅助生殖技术(ART)可以治疗部分女性卵巢早衰、年龄相关的卵巢功能障碍,但不能治疗生殖细胞缺乏的不孕不育.干细胞研究取得的重大进展,包括多种成体干细胞、人类胚胎干细胞、诱导多能干细胞等,对生殖医学有潜在的应用前景.卵巢中极少量具有自我更新和分化潜能的生殖干细胞,有产生新的卵母细胞的潜能,为卵巢再生、卵母细胞生成、女性不孕治疗提供了新的希望,也为研究生殖生理提供新的研究策略.本文综述干细胞向生殖细胞分化研究.
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精原细胞体外培养的研究进展
精原细胞包括未分化型精原细胞和分化型精原细胞.通过体外培养精原细胞,重现精子发生过程,在发育生物学、生命起源和生育控制等领域具有重要意义；通过精原干细胞的体外培养,利用其多能性,诱导其产生多种组织类型的细胞,将是再生医学研究领域的热点,本文拟就精原细胞体外培养的影响因素作一综述,旨在为精原细胞体外培养体系的建立提供借鉴.
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产后小鼠子宫内膜边缘群干/祖细胞的分离纯化
目的 分离和纯化小鼠子宫内膜边缘群(side population,SP)干/祖细胞,为进一步探讨产后子宫修复的细胞机制奠定基础. 方法 分别采用酶消化和机械分离结合法与机械研磨分离的方法,原代分离小鼠子宫内膜上皮细胞与基质细胞,通过Hoechst33342-SP法(对照加入维拉帕米),使用流式细胞仪检测子宫内膜SP细胞. 结果 未孕小鼠子宫内膜上皮与基质中均无明确SP干/祖细胞,产后哺乳期后的小鼠子宫内膜基质中含有SP干/祖细胞达(3.44±1.59)%. 结论 本研究初步检测到小鼠产后子宫内膜中含有SP干/祖细胞.产后更多SP细胞的出现可能与修复损伤的子宫内膜有关.这群sP细胞是子宫原位干细胞还是有其他来源,如何参与子宫内膜的修复,其分子机制如何,尚待进一步研究.
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卵巢衰老的临床干预新进展
女性生育力的降低显著早于全身机体的衰老,卵巢储备一般在35岁开始下降.目前卵巢衰老的诊断主要依据年龄、基础血FSH、抑制素B和血清抗苗勒氏管激素(AMH)水平及窦卵泡计数.卵巢衰老包括生理性卵巢衰老(NOA)、隐匿性卵巢功能不全(OPOI)和早发性卵巢功能不全(POI).在IVF周期中补充生长激素、脱氢表雄酮以及辅酶Q10可以部分改善NOA患者的IVF结局.目前针对POI尚无有效的临床治疗手段.卵巢组织玻璃化冷冻联合体外激活的POI临床研究获得了较好的妊娠结局.干细胞移植干预POI患者的临床研究提示其良好的应用前景.逆转卵母细胞衰老的技术中,自体生殖系线粒体能量移植(AUGMENT)在小规模临床试验中能够显著改善卵母细胞的质量和临床妊娠率.本文就卵巢衰老的临床诊断、发病机制和干预方法进行综述.
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剩余胚胎用于科研的伦理及管理
我国不孕不育人口逐渐增多,越来越多的夫妇寻求辅助生殖技术助孕,由此产生了大量的剩余胚胎.这些剩余胚胎可以被捐献用于胚胎干细胞研究,造福更多罹患重病的人,但胚胎干细胞研究面临较大伦理争议.本文将详细阐述剩余胚胎用于科学研究的伦理问题和世界各国的管理策略,希望我国积极借鉴发达国家的经验和规章制度,进一步制定和完善符合中国国情的伦理制度和法律规范.
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我院干细胞实验室的标准化设计和建设
目的 随着国内外干细胞学科临床研究的进展,为了提高我院干细胞临床研究水平,建立了标准化的干细胞临床研究实验室.方法 基于《药品生产质量管理规范》《实验室生物安全通用要求》(GB19489)、《医院洁净手术部建筑技术规范的规定》(GB50333),结合我院的实际情况设计建设了该实验室,并进行了实验室的仪器和信息系统的配置.结果 该实验室建设后运行近两年,成功实现了干细胞的制备、培养、质控及存储等功能,并利用信息系统实现了干细胞的检索和统计分析及可追溯性等功能,并成功通过了国家的干细胞基地现场验收.结论 我院干细胞实验室的标准化建设,极大地促进了我院干细胞的临床研究水平,并为下一步我院干细胞临床项目顺利开展奠定了基础.
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鸡西地区白血病发病因素分析及预防对策的研究
白血病发病急、病情凶险、严重危害人们的生命.调查鸡西市白血病的死亡率、市内水源、大气检测结果,环境因素,个人生活习惯与白血病发病的关系,总结预防白血病的策略,以减少白血病的发生,提高人们的健康水平.
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自体骨髓干细胞移植治疗糖尿病58例疗效观察
目的 观察自体骨髓干细胞移植治疗糖尿病的临床效果.方法 选取我院住院的2型糖尿病患者58例,局麻下抽取骨髓血约200毫升,经专用试剂处理后获得干细胞悬液,经外周静脉输入患者体内.观察输注前后患者血糖、胰岛素及C肽释放试验、HbA1C变化等.结果 移植后3个月、6个月,患者糖代谢紊乱情况改善.尤其是6个月后,患者FBG、2hBG、HbAI、C肽均较移植前显著下降(分别为P＜0.05,P ＜0.05,P＜0.01).结论 干细胞移植为临床治疗糖尿病的一种安全有效的治疗方法.
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干细胞的研究进展
近10年来干细胞的研究是国内外许多实验室的研究重点,相关的国内外的文献也呈上升趋势,各国都投入大量的资金建立干细胞研究中心和实验室,助力干细胞的研究.其中胚胎干细胞也涉及许多伦理问题,影响研究进程.尽管如此,干细胞的研究还是势头不减,有科学家称干细胞是21世纪一项伟大的科学发现,目前已经证实许多干细胞有增值和分化的能力.本文首先对干细胞及国内研究现状做一个简单介绍,其次介绍了干细胞的各方面作用,干细胞在抗衰老,治疗溃疡性结肠炎及骨再生领域的研究进展.后对干细胞将来的研究方向及未来的发展趋势进行讨论.
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干细胞与人体衰老
干细胞有自我增殖能力,并且有多向分化的潜能.其未分化充分,是发育不成熟的细胞,具备再生各种组织器官和人体的潜能.人的身体由上亿个细胞组成,只要专门化细胞分裂接近终点,整体的衰老也将来临.而细胞的衰老死亡又将带来内分泌系统的衰退以及微循环的障碍,从而导致人体代谢不正常和蛋白质的老化.因此,促使人体内的干细胞再次发挥分裂分化作用是延缓衰老的关键.
