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染料木黄酮对PPP2R2C在小鼠睾丸表达定位的影响
目的 明确PPP2R2C蛋白在不同发育阶段的小鼠睾丸中的表达与定位,探讨染料木黄酮(GEN)对新生小鼠睾丸组织PPP2R2C、细胞周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)和波形蛋白(Vimentin)表达的影响.方法 选用出生后1、6、10、15、20、30、60 d的雄性小鼠,采用免疫荧光技术观察PPP2R2C蛋白在各发育阶段小鼠睾丸中的细胞定位和表达;用2~3日龄雄性小鼠,取睾丸组织随机分为5组,即DMSO溶剂对照组和4个GEN剂量组(终浓度6.25、12.5、25、50μmol/L).旋转通气法体外培养72 h,HE染色观察睾丸组织病理改变,Real-time PCR测定蛋白PPP2R2C、CDK2和Vimentin mRNA表达.结果 免疫荧光结果发现PPP2R2C蛋白在小鼠睾丸间质细胞和其他细胞胞浆内表达;HE染色显示,各GEN剂量组均出现睾丸组织病理改变;Real-time PCR检测显示,6.25 μmol/L GEN组PPP2R2C mRNA表达高于对照组(P=0.021),各剂量组CDK2 mRNA表达呈下降趋势(P>0.05),GEN各剂量组Vimentin mRNA表达略有降低,但是差异无统计学意义(P>0.05).结论 本研究首次发现PPP2R2C蛋白在小鼠睾丸组织中表达,其可能参与了小鼠睾丸发育、细胞分裂和精子发生过程.GEN可能通过调节体外培养小鼠睾丸PPP2R2C、CDK2和Vimentin基因的表达,影响睾丸发育和精子发生过程.
关键词: PPP2R2C 睾丸 染料木黄酮 细胞周期蛋白依赖性激酶2 波形蛋白