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B型流感病毒细胞凋亡作用的体外研究
[目的]研究B型流感病毒导致的体外培养狗肾传代细胞凋亡作用,初步探讨流感病毒细胞毒性发生机制. [方法]采用Hoechst 33258荧光染色观察形态学变化,DNA片段的琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡,流式细胞术ANNEXIN V-FITC加碘化丙啶(PI)双染定量检测细胞凋亡率和坏死率. [结果]加入不同滴度的B型流感病毒培养6小时后开始出现细胞核荧光强度增强,染色质沿核周分布现象.DNA电泳呈典型的"梯形"条带.流式细胞术检测发现,不同滴度流感病毒作用后,细胞凋亡率明显高于空白对照组,差异有显著性(P<0.05).流感病毒滴度越高,凋亡率也越高,但当流感病毒滴度为1:128时,细胞坏死率增加.滴度为1:64的流感病毒诱导的细胞凋亡,随着作用时间的延长,凋亡率明显增高,作用18 h达高峰,而后细胞凋亡率下降. [结论]体外培养条件下B型流感病毒能诱导MDCK细胞凋亡,并存在量-效与时-效关系.
