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比较两种小鼠胚胎培养方法在辅助生殖实验室质量控制中的应用
目的:检测辅助生殖实验室的培养体系是否存在对胚胎有害的内毒素,以保证培养体系的可靠性,比较两种培养方法敏感性.方法:收集小鼠合笼后2细胞期胚胎,采用一直添加白蛋白和24h后去除白蛋白两种方法培养,观察胚胎发育情况;结果:96h的囊胚形成率分别为90.37%、86.15%,无统计学差异(P＞0.05),而早期囊胚、扩张囊胚和孵化囊胚形成率有统计学差异(P＜0.01),扩张囊胚和孵化囊胚评分有统计学差异(P＜0.05).结论:建立一个高水平的生殖医学中心,必须有一套严格的实验室质量控制系统,上述两种方法均可作为实验室培养体系检测的评价指标,但去除白蛋白培养的方法更敏感.
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改进的EBSS培养液与常用商品化试剂对鼠胚体外发育的影响
目的：利用改进后的EBSS(SIGMA)培养液和常用商品化培养液G1/G2（Vitrolife），Quinn's1026/Quinn's1029（SAGE）对昆明系小白鼠胚胎进行体外培养，以对新建IVF实验室进行评估。方法对简单培养液EBSS进行改进，分别制得卵裂培养液和囊胚培养液以构成序贯培养系统。卵裂培养液：EBSS中加入适当浓度的丙酮酸钠，乳酸钠以及5种非必须氨基酸；囊胚培养液：EBSS中加入适当浓度的5种非必须氨基酸及6种必须氨基酸。将胚胎分成4组，A组使用EBSS（Earle's Bal-anced Salt Solution）培养液，B组使用改进后的EBSS培养液，C组使用G1和G2培养液，D组使用Quinn's1026和Quinn's1029培养液，四种培养液均添加10%人血清白蛋白。结果72 h后，鼠胚总体囊胚形成率为70.57%（614/870），其中A组的囊胚形成率为26.21%（27/103），B组为72.22%（143/198），C组为73.81%（155/210），D组为80.50%（289/359）B,C,D 3组的囊胚形成率显著高于A组（P<0.001)。结论通过鼠胚体外培养，对新建试管婴儿实验室进行了较好的质控检测，经改进后的EBSS培养液在鼠胚囊胚形成率上与商品化序贯培养液G1/G2，Quinn's1026/Quinn's1029相近，均远高于简单培养液EBSS，但前者成本较之常用商品化试剂有大幅度的降低，说明改进的EBSS培养液在鼠胚体外培养上具有较好的实用价值。
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不同来源小鼠胚胎培养在辅助生殖实验室质量控制中的应用
目的:利用小鼠胚胎体外培养技术对新建人类辅助生殖实验室进行质量控制,以保证培养体系的可靠性,并比较两种小鼠胚胎培养方法在实验室质量控制中的作用.方法:采用小鼠配子体外授精法和2-细胞胚胎收集法对胚胎进行培养,观察胚胎发育情况.结果:小鼠配子体外授精法的受精率为80.98％,受精卵的卵裂率、优质胚胎率及囊胚形成率分别为90.60％、68.15％、85.93％与收集的体内2-细胞卵胚胎的88.98％、70.33％、83.89％比较无显著性差异,P＞0.05.结论:两种不同来源鼠胚培养方法均可作为实验室培养体系检测的评价指标.对于新建的胚胎培养实验室,小鼠配子体外授精法可对IVF的全过程进行检测,更能反映培养体系对胚胎的影响,同时还可熟练IVF的操作技能.
