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  • HCV核心蛋白在大肠杆菌中的表达及免疫学特性研究

    作者:赵玮;廖国阳;李卫东;张新文;孙明波;陈俊英;姜述德

    目的研究HCV核心蛋白在大肠杆菌中的非融合表达及重组蛋白的免疫学特性.方法用DNA重组技术在两种表达质粒(pQE3O和pTrcHisA)、4种宿主菌(DH5a, TOP10, BL21和M15)中表达HCV全长及羧基端部分缺失的核心蛋白(aa1~191,aa1~154和aa1~69),表达蛋白经SDS-PAGE检测,免疫印迹分析,亲和层析法纯化后免疫BALB/C小鼠,ELISA法检测免疫小鼠血清中抗HCV抗体水平.结果 HCV核心蛋白C154, C191在pQE30/M15中获得了表达,表达量分别占菌体总蛋白的18.2%和9.3%.免疫印迹分析的结果显示在C154和C191相应位置处出现杂交条带.ELISA结果显示C154和C191诱导小鼠产生了抗HCV 抗体.结论表达的重组蛋白具有抗原特异性和免疫原性.“截断”型HCV核心蛋白的抗原性和免疫原性并未因羧端的部分缺失而减弱.

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