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  • 重组福安泰-03融合蛋白表达条件的优化及其生物学活性检测

    作者:张永平;马润娣;于立坚;苏伟明;廖铭能;黄来珍;于廷曦

    福安泰-03 (FAT-03)是从赤魟组织中分离得到,具有强抗血管生成活性的蛋白.本研究通过DNA重组技术获得了重组福安泰-03 (rFAT-03)融合蛋白,运用响应面试验设计法优化表达条件,采用GST亲和柱分离纯化表达蛋白,比较分析不同培养时间、诱导剂浓度、诱导温度和诱导时间对可溶性融合蛋白表达量的影响.结果表明,当培养时间为6.13h、诱导温度为19.71℃、诱导剂(IPTG)浓度为0.36 mmol/L、诱导时间为13.60 h条件下可获得较好的表达效果,可溶性目的蛋白GST-rFAT-03的得率为7.57 mg/L.对获得的rFAT-03生物活性检测显示,rFAT-03能明显抑制鸡胚绒毛尿囊膜血管生成,且其效果与剂量相关.为后续对该蛋白的分离纯化和生物学功能研究奠定了基础.

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