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U251胶质母细胞瘤细胞系文献资料
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反义miR-221/222上调p27~(kipl)对胶质母细胞瘤U251的放射增敏作用
目的 探讨敲低微小RNA(micro RNA,miRs)-221/222表达上调p27~(kipl)对U251胶质母细胞瘤细胞系放射敏感性的影响.方法 经生物信息学分析查询miR-221/222成熟体序列和它们与p27~(kipl)的关系.脂质体共转染反义寡聚核苷酸(反义miR-221/222)下调U251胶质母细胞瘤细胞系miR-221与miR-222的表达.使用Northern印迹方法鉴定转染后U251细胞miR-221、miR-222表达水平下调;流式细胞术检测转染后U251联合X线照射的细胞周期分布;克隆形成实验验证各组细胞增殖性死亡;Western 印迹分析p27kipl蛋白的表达变化.结果 经生物信息学分析显示miR-221/222成熟体序列的种子序列几乎一致,p27~(kipl)是miR-221/222的靶基因.Northern印迹分析显示反义miR-221/222共转染组使miR-221/miR-222的表达水平明显下降.转染无义序列组及对照组的miR-221/miR-222表达水平没有改变.流式细胞术检测可见反义miR-221/222共转染组细胞周期阻滞于G0/G1期且明显高于其它各组.经X线照射后,可明显降低S期比例.反义miR-221/222联合X线照射可增加U251细胞增殖性死亡.Western印迹分析显示反义miR-221/222共转染组的p27~(kipl)蛋白表达明显上调.结论 反义miR-221/222通过上调p27kipl蛋白表达可增加U251胶质母细胞瘤细胞系的放射敏感性.
