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TLR7基因的SNP和CNV与自身免疫性疾病相关性的研究进展
自身免疫性疾病(autoimmune diseases,AID)是指抗体作用于自身抗原,导致机体受到损害所致的一类复杂性疾病,被认为是遗传和环境共同作用的结果.近期研究表明,AID患者易感性的升高可能与Toll样受体7基因单核苷酸多态性与拷贝数变异相关,这为进一步了解AID的发病机制提供了线索.本文就其研究现状进行综述.
关键词: 自身免疫性疾病 Toll样受体7基因 单核苷酸多态性 拷贝数变异 -
猪Toll样受体7基因人工miRNA表达质粒的构建与筛选
目的 构建猪Toll样受体7(TLR7)基因的人工miRNA (amiRNA)特异性表达载体,筛选有效amiRNA.方法 RT-PCR扩增猪TLR77基因的1984 ~2648 bp序列,构建融合表达载体pTLR7-EGFP.设计针对猪TLR7的5对amiRNA,构建重组干扰质粒pcDNA5-miRTLR7.将pcDNA5-miRTLR7和pTLR7-EGFP共转染NIH-3T3细胞,通过RT-PCR检测amiTLR7的表达,以荧光显微镜观察和流式细胞术分析干扰效率.结果 5个amiTLR7都成功表达,且均能沉默NIH-3T3细胞中TLR7基因的表达,抑制效率为36.99%到97.28%,其中amiTLR7-3效果佳.结论 成功构建了针对猪TLR基因的amiRNA表达质粒,筛选出了沉默猪TLR7基因的佳干扰序列.
关键词: Toll样受体7基因 人工miRNA RNA干扰 筛选