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两种细胞洗涤剂制备脱细胞同种生物带瓣管道支架的研究
目的比较去氧胆酸钠(deoxycholic acid, DOA)和十二烷基硫酸钠(sodium dodecylsulphate, SDS)两种细胞洗涤剂制备脱细胞的同种生物带瓣管道(homograft bioprosthetic tube valved, HBTV)支架的效果,为体外构建组织工程瓣(tissue-engineering heart valve, TEHV)提供同种生物瓣支架材料. 方法对同种带瓣主动脉管道和带瓣肺动脉管道,分别用含0.5% DOA或0.03% SDS的Tris低渗缓冲液共同孵育48 h,脱去经液氮保存、具有活性的HBTV表面的内皮细胞,固定剂固定后分别进行HE、胶原纤维和弹力纤维染色的光镜观察,以及扫描电镜观察,摄片. 结果两种洗涤剂均完全地脱去了HBTV表面的内皮细胞,中心部位的成纤维细胞有部分存留;细胞外基质,如胶原纤维和弹力纤维等均较完整地保留下来,其形态结构与脱细胞前无明显改变. 结论 0.03%~0.1% SDS或0.5% DOA的低渗缓冲液对制备HBTV脱内皮细胞支架效果均较佳,有利于HBTV再内皮化时种植细胞的黏附和扩增,可进一步应用于体外构建TEHV的研究.对于脱主动脉壁的细胞,SDS浓度应增至0.1%为佳.