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  • 采用核转染技术建立稳定表达可溶性人类白细胞抗原G1的真核细胞系

    作者:曾梦华;房崇芸;王树森;朱珉;谢林;王璐;李荣;吴雄文;陈实

    目的 建立稳定表达可溶性人类白细胞抗原G1(soluble human leucocyte antigen G1,sHLA-G1)的真核细胞系.方法 采用核转染技术将质粒pcDNA3-sHLA-G1转入不表达HLA-Ⅰ类分子的LCL721.221细胞,经G418筛选获得稳定转染细胞,通过RT-PCR及Dot-ELISA在基因和蛋白水平鉴定目的基因的表达.结果 采用核转染法LCL721.221细胞转染效率可以达到约14%.RT-PCR检测发现了sHLA-G1基因特异性条带;采用Dot-ELISA方法利用sHLA-G1特异性抗体MEM-G/9检测,存在sHLA-G1蛋白. 结论 通过核转染方法成功建立了稳定表达sHLA-G1的真核细胞系.

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