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  • C57BL/6J小鼠体外腭突悬浮培养过程中血小板衍化生长因子受体α的表达变化

    作者:丛雯雯;张岱尊;肖文林;薛令法;许尧祥

    目的 构建C57BL/6J小鼠腭突体外培养模型,研究血小板衍化生长因子受体α(PDGFR-α)在小鼠腭突体外培养不同时间段的表达变化.方法 应用悬浮培养法分别培养腭突24、36、48 h,体视显微镜及苏木素-伊红(HE)染色观察腭突发育情况.免疫组织化学检测腭突体外培养不同时间段组织中PDGFR-α的表达定位, Western blot检测腭突体外培养不同时间段组织中PDGFR-α的时空表达变化.结果 体视显微镜和HE染色结果均显示,体外培养24 h,双侧腭突向中线方向靠近生长,间隙变窄;36 h,镜下观察到双侧腭突接触,HE切片观察到腭中嵴上皮缝的形成;48 h,镜下观察到双侧腭突融合,HE切片观察到腭中嵴上皮缝消失.PDGFR-α在腭突体外悬浮培养24 h时表达高,36及48 h后逐渐降低.结论 本实验改进的腭突体外悬浮培养方法模拟了腭突的体内发育环境,为应用体外腭突培养模型研究腭裂复杂的发病机制奠定了基础.笔者采用的体外悬浮培养方法证明腭突发育相关基因PDGFR-α在体外培养腭突的表达变化与其体内表达是一致的.

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