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离线二维高效液相色谱法文献资料
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2D-HPLC同时测定小鼠胸腺中的酸性氨基酸异构体
目的 研究D-酸性氨基酸的代谢组学,建立同时分离和定量体内样品中酸性氨基酸D、L体的离线二维HPLC法.方法 利用硅胶基质ODS整体柱为第一维分离色谱柱,流动相为乙腈-三氟醋酸-水(9∶0.05∶91);Chiralpak QD-1-AX色谱柱为第二维手性分离柱,流动相为含10 mmol·L-1柠檬酸的甲醇-乙腈(50∶50),荧光法检测,离线手性2D-HPLC分析系统.结果 两对对映体能同时得到良好地分离(Rs＞2.50);各异构体的定量线性范围均为0.005 ～5 pmol(r＞0.9998),检出限和定量限分别为2、5 fmol,回收率均在98％ ～ 105％,日内日间精密度的RSD均＜5％.应用该法测得SAMP1及SAMR1小鼠胸腺组织中D-天门冬氨酸的浓度分别为212.2、163.4 nnmol·g-1(n=6).结论 所用方法具有较高的选择性、灵敏度和准确性,可用于体内样品中酸性氨基酸异构体的同时测定.
